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            新聞動態
            想知道化學發光顯色試劑盒的應用不妨看看本篇
              化學發光顯色試劑盒可用于血清胸苷激酶單克隆抗體酶促化學發光試劑盒的研制
             
              制特異性強、靈敏度高的檢測S-TK1(血清胸苷激酶)的單克隆抗體酶促化學發光試劑盒,以用于腫瘤早期檢測、預后和術后觀察及臨床療效監控。
             
              方法:制備一對抗S-TK1單克隆抗體。1抗體制備A.設計并合成長度為15個氨基酸的S-TK1多肽,并與載體蛋白KLH耦聯制備多肽抗原;B.從Raji細胞提取物中純化獲得TK1抗原蛋白;C.抗S-TK1多肽抗原單克隆抗體的制備:常規免疫Balb/c小鼠,選擇血清抗體滴度較高的小鼠,取脾細胞與SP2/0小鼠骨髓瘤細胞進行細胞融合,用間接ELISA篩選獲得7株高親和力的抗S-TK1多肽的單克隆抗體,用于制備包被抗體;D.抗Raji細胞TK1抗原蛋白單克隆抗體的制備:方法如C,獲得3株高親和力的Raji細胞TK1抗原蛋白單克隆抗體,用于制備檢測抗體。
             
              2.抗體鑒定通過對小鼠進行小規模的腹水生產,用蛋白質A親合柱從每個腹水樣本中分離純化單克隆抗體,經ELISA.免疫印跡法鑒定單克隆抗體效價、特異性、親和力以及種屬交叉反應,最后用旋轉瓶培養技術進行抗體生產。
             
              3.制作S-TK1酶促化學發光試劑盒1抗體配對將7株高親和力的抗S-TK1多肽的單克隆抗體和3株高親和力的Raji細胞TK1抗原蛋白單克隆抗體配對,用ELISA進行測試。標記抗體使用辣根過氧化物酶(horseradishperoxidase,HRP)標記檢測抗體。
             
              化學發光法試劑盒工作參數的確定以魯米諾、吐溫-20為化學發光底物;經比較確定包被抗體和檢測抗體的稀釋度;包被抗體即用稀釋的抗體加在酶標板上4℃溫育過夜,之后洗滌,干燥過夜,用透明膠帶封存。
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